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Proteínas (Determinação de Nitrogênio Total) não medimos a proteína diretamente, mas sim o Nitrogênio presente na amostra. ● O Método de Kjeldahl: ○ Este é o método padrão para análise de proteínas em alimentos. ○ 🔹 Ponto importante: O método baseia-se na premissa de que a maioria das proteínas contém, em média, 16% de nitrogênio. ○ Cai na prova: Por causa dessa média de 16%, utilizamos um Fator de Conversão (6,25). Após descobrir quanto nitrogênio tem na amostra, multiplicamos por 6,25 para achar o valor da proteína bruta. ● As Três Etapas do Método (Crucial para a prova): 1. Digestão: ■ A amostra é colocada em um tubo de ensaio longo (tubo de Kjeldahl) com Ácido Sulfúrico (H2SO4) concentrado e um catalisador. ■ O tubo é aquecido a altas temperaturas (cerca de 400°C) no bloco digestor. ■ O que acontece: Toda a matéria orgânica é "destruída" e o nitrogênio é transformado em Sulfato de Amônia. ■ 🔹 Ponto importante: A digestão termina quando a solução, que era preta/escura, fica límpida e transparente (esverdeada ou azulada). 2. Destilação: ■ Após esfriar, adicionou-se Hidróxido de Sódio (NaOH) concentrado para tornar o meio básico. ■ Isso libera o nitrogênio na forma de gás amônia (NH3). ■ Esse gás passa por um condensador e é recolhido em um Erlenmeyer contendo Ácido Bórico. ■ 🔹 Destaque de aula:o indicador no ácido bórico muda de cor (geralmente de vermelho/rosa para verde) quando a amônia começa a cair nele. 3. Titulação: ■ É a etapa final de medição. Titula-se o conteúdo do Erlenmeyer com uma solução padronizada de Ácido Clorídrico (HCl) ou Sulfúrico. ■ O volume de ácido gasto na titulação é o que usamos para calcular a quantidade de nitrogênio. ● 🔥 Cai na prova: o "Nitrogênio Não Proteico". O método de Kjeldahl mede o Nitrogênio Total, ou seja, se o alimento tiver ureia ou outros compostos nitrogenados que não são proteínas, o resultado pode ser falsamente alto (fraude do leite com ureia, por exemplo). ● Informação complementar: O fator 6,25 é geral, mas existem fatores específicos para certos alimentos, como 5,70 para trigo e 6,38 para leite, devido à composição diferenciada de seus aminoácidos. Proteínas (Determinação de Nitrogênio Total)