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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS CURSO: Farmácia DISCIPLINA: Análise de Alimentos NOME DO ALUNO: Carolina Capuci Cipriani R.A: 0424252 POLO: Boqueirão PRÁTICAS REALIZADAS: Polo Rangel / Santos - 11/03/2023 e 18/03/2023 Servięo Social INTRODUÇÃO Ainda que a água encontrada nos alimentos possa ajudar na hidratação corporal, ela não deve ser usada no lugar de água potável. Para se obter água ideal para o consumo, temos que recorrer a variados métodos com a finalidade de eliminar os microrganismos, clarificar, etc. Os métodos mais comuns de tratamento são: filtração, cloração, ozonização, raios ultravioleta, resinas trocadoras de íons (MORETTO et al., 2008). A ingestão regular de água é de extrema importância para o bom funcionamento do organismo, graças a ingestão de água, nosso corpo pode realizar diversas atividades metabólicas, como controlar a temperatura, transportar substâncias importantes para as células, e promover a eliminação de toxinas e excessos. O teor de umidade afeta a processabilidade, vida útil, usabilidade e qualidade de um produto. Sendo assim vemos a importância na determinação do teor de umidade, portanto, desempenha uma função importante na garantia de qualidade para muitos setores, como as indústrias Alimentícia, Farmacêutica e de Produtos Químicos. (METTLER TOLEDO.) A determinação de cinzas, tem uma importância significativa em alimentos, uma vez que podem causar problemas de incrustações nas tubulações ou diminuir a eficiência de produtos usados. A cinza é o conteúdo mineral de uma amostra de alimento, trata-se do resíduo inorgânico formado após a queima da matéria orgânica. É constituída principalmente por grandes quantidades de K, Na, Ca e Mg, pequenas quantidades de Al, Fe, Cu, Mn e Zn e traços de Ar, I, F e outros elementos / minerais (Cl, Pb, etc.). O teste de Fehling é muito usado para identificar se um composto com grupos funcionais carbonilo trata-se de um aldeído ou de uma cetona. O complexo de bistartarocuprato(II), presente na solução final, é um agente oxidante. O composto a testar é adicionado à solução de Fehling e a mistura é aquecida. Aldeídos são oxidados, dando um resultado positivo, ao contrario das cetonas. A refratometria é o método que determina o índice de refração de uma substância com o intuito de avaliar sua composição. O índice de refração é uma característica óptica de uma substância e do número de partículas dissolvidas nela, é definido como a razão entre a velocidade da luz no espaço vazio e a velocidade da luz através de uma substância. Servięo Social Um resultado dessa propriedade é que a luz vai “desviar” ou mudar de direção, quando viaja através de uma substância de índice de refração diferente. Isso é chamado de “REFRAÇÃO”. A reação de caramelização envolve a degradação do açúcar quando não há presença de aminoácidos ou proteínas. Os açúcares são relativamente estáveis ao aquecimento moderado, porém em temperaturas elevadas, acima de 120°C são pirolisados para diversos produtos degradação e alto peso molecular e escuros, denominados caramelo. Pode ocorrer em meio ácido ou alcalino, porém a velocidade da reação é maior em meio alcalino e forma a melainodina (pigmento escuro) Aula 1 – Roteiro 1 : Determinação de umidade, cinzas e atividade de água Prática de determinação de umidade: a determinação da umidade de alimentos é uma das medidas mais importantes e utilizadas, está relacionada com: estabilidade, qualidade e composição dos mesmos. Secagem em estufa: o método de secagem em estufa a 105 °C até um peso constante requer uma série de cuidados, embora seja um método de fácil execução. Conforme as dimensões a que foi reduzida a amostra, a evaporação da água pode ser muito lenta. A sensibilidade dos instrumentos de medida, também, é importante nessa determinação, além da prática do analisador. OBJETIVO: determinação do teor de umidade e conteúdo de sólidos totais de alimentos. PROCEDIMENTO: Queijo ralado 1. - Identificar a capsula; 2. - Pesar a capsula vazia; Servięo Social 3. - Pesar 5g de amostra triturada, homogênea; 4. - Cadinho vazio 5. - Com queijo Cálculo de teor de umidade: Peso da cápsula de porcelana vazia= 61,1101 Peso da amostra = 5,0003 Massa da amostra + cápsula de porcelana = 66,1104 Peso tirado da estufa = 65,39001 Cálculo = 65,39001 – 61,1101 = 4,2799 Massa da amostra / 5,0003 – 4,2799 = Massa perdida = 0,7204 5,0003 --- 100% 0,7204 --- X = 𝑥 = 0.7204.100/5.0003 X = 14,40% A massa perdida no procedimento de secagem na estufa foi 0,7204g equivalente a 14,40% do peso da amostra. Quando falamos em produção, a água contribui para melhorar a qualidade do produto, mas o excesso ou a falta dela pode ser prejudicial, por isso a medição é muito utilizada na análise do alimento. PROCEDIMENTO: prática de determinação de cinzas: cinza de um alimento é o resíduo inorgânico que após a queima da matéria orgânica, que é transformada em CO2 H2O e NO2. OBJETIVO: Determinação do teor de cinzas de alimentos. PROCEDIMENTO: 1. Triturar o alimento em um almofariz com pistilo (alimentos líquidos devem ser, previamente, evaporados); Servięo Social 2. Pesar, 5g da amostra que no caso foi queijo ralado; 3. Carbonizar o alimento; após a carbonização colocar o em uma mufla a 550ºC até a eliminação completa do carvão, e o aparecimento de coloração branca ou cinza clara; 4. Resfriar em dessecador até a temperatura ambiente; 5. Repetir as operações de secagem e de resfriamento até o peso constante; Peso do cadinho vazio = 29.6706 Peso da amostra = 3.0933 Peso do cadinho + as cinzas = 29.8284 Cálculo = 29.8284 – 29.6706 = 0,1578 Peso das Cinzas = 0,1578 Porcentagem 3.0933 --- 100% 0,1578 --- X = 𝑥 = 0,1578.100/3,0933 X = 5,10% Conclusão: Após a finalização do processo de determinação de cinzas tivemos o seguinte resultado: cinzas totais secas 0,1578, equivalente a 5,10% do valor da amostra. Atividade de água (Aa): um método para determinar o valor da Aa utiliza dessecadores com soluções saturadas de sais que fornecem atmosferas de umidade relativa conhecida. Essas soluções criam ambientes de umidade relativa ou atividade de água, conhecidas dentro dos dessecadores sob vácuo. Amostras de alimentos colocadas dentro desses ambientes trocarão umidade com o mesmo, de modo que elas se igualem depois de um determinado tempo. A perda ou o ganho de água pelas amostras permitirá que se calcule a atividade de água do alimento. OBJETIVO: observação do efeito da atividade de água nos alimentos. Servięo Social Para essa atividade utilizamos 3 estufas: Estufa 1 – colocamos em um béquer de 50mL, 5,000g de aveia + 25mL de ácido sulfúrico; Estufa 2 – colocamos em um béquer de 50mL, 5,000g de aveia + 25mL de sulfato de sódio Estufa 3 – colocamos em um béquer 50mL, 5,0074g de aveia + 25mL de carbonato de cálcio. Resultado dos pesos finais (Bequer + Resíduos) Ácido sulfúrico Sulfato de Sódio Carbonato de Cálcio Aveia 36,10 36,50 33,8918 “sal” 74,98 47,66 52,2505 Bequer (g) Aveia (g) 31,47 5,00 31,56 5,00 29,0300 5,0074 Bequer (g) Volume “sal” (ml) 30,73 25 31,2 25 29,7144 25 Manual de Estágio Aula 2 – Roteiro 1 : Reação de Fehling, refratometria de Mailard e Caramelização 1 - Reação de Fehling - Qualitativo Pipetou-se em diferentes tubos de ensaio, 2 mL de solução aquosa a 4% dos seguintes carboidratos: glicose, frutose, lactose, sacarose e amido. Adicionou-se a cada tubo 2 mL do reagente de Fehling (1 mL de A + 1 ml de B). Aqueceu os tubos embanho-maria fervente, por 5 minutos e comparou os resultados. Em novos tubos, pipetou-se 2 mL da solução aquosa a 4% de sacarose e a 4% de amido. Adicionou-se 4 gotas de HCl 6N e aqueceu por 2 minutos em banho-maria fervente. Após deixou esfriar, adicionou-se 2 mL do reagente de Fehling (1 mL de A + 1 mL de B) e aqueceu em banho-maria fervente, durante 5 minutos. Comparou os resultados obtidos: RESULTADOS: Após as reações foi possível identificar que glicose, frutose e lactose são açucares redutores, pois apresentaram uma coloração escura que representa a oxidação. A sacarose e o amido são açucares não redutores pois não houve alteração na coloração, ou seja, não ocorreu oxidação. Amostras antes e depois do banho-maria Manual de Estágio Na segunda etapa a sacarose teve reação nos primeiros segundos, apresentando uma coloração verde clara, e após o banho maria ficou verde escuro com um precipitado de cor tijolo esse resultado ocorreu por causa da abertura das cadeias de carboidratos da sacarose. Enquanto o amido não mostrou reação. Amostras antes e depois do banho-maria 2 - Refratometria - Quantitativo Prática demonstrativa: Ao trabalhar com o refratômetro, não deve tocar as superfícies de vidro com os bastões de vidro ou o conta-gotas para não as arranhar: Verificar se as superfícies de vidro estão limpas. Caso contrário, passar sobre elas um chumaço de algodão embebido em álcool; Calibrou-se o refratômetro com água destilada. Seu índice de refração, a 20 ºC, é de 1,3330 e coincide com o zero na escala de Brix (ºBx); Enxugou-se a superfície do prisma com algodão embebido em álcool; Deixou secar e colocou-se algumas gotas de amostra sobre a superfície de vidro (solução de sacarose, suco de laranja, calda de compota de fruta, mel, melado ou xarope de glicose); Fechou o refratômetro; Ajustou-se a ocular para a sua visão; Na escala do índice de refração, ler o índice de refração ou, na escala de Brix, leu a concentração de sólidos solúveis (g de açúcar/100 g de solução). Anotou-se as leituras. Manual de Estágio Resultados e discussão A pratica foi aplicativa para obtermos conhecimento e não tivemos resultados. Reação de Maillard - Qualitativo Objetivo: Verificar a reação de Maillard entre os aminoácidos e os monossacarídeos, e a alteração de cor e aroma das amostras. Procedimento 1: Colocou-se em tubos de ensaio separados 0,5 g de glicose e mais 0,5 g de um dos seguintes: aminoácidos: metionina, leucina, fenilalanina, asparagina; Identificou-se os tubos e adicionou-se 2,0 mL de água destilada a cada tubo. Homogeneizou-se e fechou os tubos com filme plástico (foi feito pequenos furos no filme para evitar o seu rompimento); Colocaram-se os tubos em banho-maria fervente; Observou- se a alteração de aroma e cor em cada tubo, após 60 minutos de reação. RESULTADOS: Após o tempo de reação observamos que não houve alteração na coloração, pois o tempo de reação ou a temperatura do banho não foi suficiente, porém foi possível notar a alteração no odor. Procedimento 2: 1- Pesamos 2 amostras de 10 g de leite em pó e coloque em duas placas de Petri grandes; 2- Em uma das amostras acrescentamos 5 g de sacarose e, na outra, 5 g de glicose. Identificamos as placas; 3- Acrescentou 10 mL de água em ambas as placas. Homogeneizou, colocou-se as placas em estufa a 100 ºC. Comparamos os resultados após 45 minutos. RESULTADOS E DISCURSSÕES: Manual de Estágio Após retirado da estufa observou-se que a amostra de leite contendo glicose apresentou a coloração mais escura que a amostra contendo sacarose, pois a glicose é um açúcar redutor onde ocorre o processo de oxidação e a sacarose é um açúcar não redutor. 1- Caramelização Objetivo: Verificar a reação de caramelização em meio ácido e alcalino. Prática demonstrativa: Os caramelos devem ser preparados na capela, pois há o risco de explosão dos mesmos. Pesou-se 3 porções de 10 g de sacarose em béqueres de 100 mL. Acrescentou-se em béquer 20 mL de água destilada (pH 7,0), ao outro, 20 mL de solução de HCl 0,25M e ao terceiro, 20 mL solução de NaOH 0,25 M. Identificou-se os béqueres. Aqueceu os béqueres em chapa agitando-os, até a completa dissolução da sacarose. Continuou no aquecimento, sem a necessidade de agitação. Comparou as cores obtidas com os diferentes tratamentos. RESULTADOS: Observamos que a amostra com presença de HCl ocorre a oxidação pelo fato que o pH muito baixo a reação ocorre mais lentamente. A amostra com presença de NaOH não ocorre oxidação pois a reação ocorre com uma velocidade maior. A amostra contendo água é uma amostra padrão para efeito de comparação pois a sacarose é um açúcar não redutor e não ocorre a oxidação. Manual de Estágio Processo de Caramelização, béqueres na chapa e após o aquecimento até o ponto de caramelização AULA 2 – ROTEIRO 2: Extração de lipídios de amostras alimentícias do índice de acidez: OBJETIVO: Determinar o teor de lipídios em amostras alimentícias com uso de extrator tipo Soxhlet ou estrato contínuo como uso de solvente orgânico. Parte I – Extração de Lipídeos: Procedimento: Triturou – se a amostra (OLEO/AZEITE) Pesou-se cerca de 3,00g da amostra triturada em um cartucho de celulose; Pesou-se e anotou -se a massa do balão de fundo chato, previamente identificado. Levou- se o balão até a capela onde foi adicionado o solvente éter etílico; Montou-se o sistema de Soxhlet; Extraiu-se a amostra por 4h; O solvente foi evaporado e levado em estufa aquecida até o desaparecimento do cheiro do solvente; Depois de resfriada a amostra foi pesada. Manual de Estágio Resultados Amostra (OLEO/AZEITE) – 123,63 Balão vazio – Balão cheio - 126,73 –3,10 % lip = m.lípidio x 100 m.amostra %lip = -3,10/3G %lip = -01,033 x 100 % lip = 13,3% CONCLUSÃO: Concluímos que o método de Soxhlet é eficaz para a extração de lipídios na amostra de alimentos, sendo assim pode-se fazer a separação e a quantificação do lipídio no salgadinho da marca torcida sabor cebola e observar e compreender o processo físico- químico abrangidos, sendo que no salgadinho foi determinado 38,16% de teor de lipídios. Parte II – Índice de Acidez A determinação do Índice de Acidez quantifica os ácidos graxos livres presentes em óleos/gorduras, através da hidrólise, oxidação ou fermentação dos triglicerídeos. A presença de calor e luz aceleram a decomposição dos óleos, sendo a rancidez quase sempre acompanhada pela formação de ácidos graxos livres. Esta prática tem por objetivo determinar o índice de acidez de óleo. PROCEDIMENTO: Pesou-se 2,0g de amostra de lipídeo em Erlenmeyer, em seguida adicionou-se 25mL de solvente misto (Éter Etílico e Etanol 2:1). Preparou-se uma bureta de 25mL com solução de NaOH 0,01M. Adicionou-se 2 gotas do indicador de fenolftaleína na amostra. A amostra foi titulada com a solução de NaOH 0,01M, com agitação constante até o seu ponto de viragem, coloração rósea clara, a coloração permaneceu por 30 segundos. Manual de Estágio Resultado: I.A.= Índice de acidez V = mL de solução de NaOH gasto na titulação = 9,1mL F = fator da solução de NaOH = 0,9998 P = gramas da amostra = 2,01g M = molaridade da solução de NaOH. Conclusão: com as análises realizadas foi possível observar que não é recomendado a reutilização de óleos que já foram aquecidos ou expostos a luz em ambiente aberto devido a hidrólise e oxidação que ocorrem, desenvolvendo assim valor elevado de ácidos graxo livres, não sendo indicado para o consumo humano. Manual de Estágio AULA 3 – ROTEIRO 1: Determinação dos índices de iodo e peróxidos de óleos e gorduras: OBJETIVO: Determinar os índices de iodo de óleos e de gorduras. PROCEDIMENTO: 1- Índice de Iodo: 1. Pesou-se 0,25 g de amostra (óleo) em umErlenmeyer de 500 mL; 2. Adicionou-se 10 mL de Hexano na capela; 3. Adicionou-se 25 mL de solução de Wijs, tampou e agitou cuidadosamente, com os movimentos de rotação até a completa homogeneização na capela, usou-se uma pipeta volumétrica de 25; 4. Deixou-se em repouso, ao abrigo da luz e a temperatura ambiente, por 30 minutos; 5. Após o repouso, adicionou-se 10 mL da solução de iodeto de potássio a 15%; 6. A titulação foi feita em duas etapas. Na primeira, titulou com a solução tiossulfato de sódio 0,1 M até o aparecimento de uma fraca coloração amarela; 7. Adicionou-se 5 mL de solução indicadora de amido 1% e continuou a titular até o completo desaparecimento da cor azul (segunda etapa da titulação); 8. Preparou-se uma determinação em branco e proceder da mesma maneira que a amostra; 9. Repetir para uma amostra distinta. Manual de Estágio OBJETIVO: Determinar os índices de iodo de óleos e de gorduras comparar o grau de deterioração de óleo novo e óleo usado. I.I. = índice de iodo; vb = mL gastos na titulação do branco; va = mL gastos na titulação da amostra; P = gramas da amostra; M = molaridade da solução de tiossulfato de sódio Branco e sem óleo: 37,7 Volume até colocar o amido: 21,4 Volume até ficar titulação branco com amido: 26,0 Conclusão: Em cada grama de lipídio 54,31 mg de iodo. 1 - Índice de Peróxidos: Manual de Estágio 1. Pesou-se 5,00 g de amostra em um Erlenmeyer de 250 Ml 2. Adicionou-se 20 mL de solução de ácido acético: clorofórmio (3:2), na capela, e agitou-se até a dissolução da amostra; 3. Adicionou-se 0,5 mL da solução saturada de iodeto de potássio e deixou em repouso ao abrigo da luz por, exatamente, um minuto; 4. Acrescentou-se 20 mL de água e titular com a solução de tiossulfato de sódio 0,01 N, com uma constante agitação. A titulação foi feita em duas etapas. Na primeira, titular até o aparecimento de uma fraca coloração amarela; 5. Adicionou-se 1 a 2 mL de solução indicadora de amido 1% e continuou a titular até o completo desaparecimento da cor azul (segunda etapa da titulação); 6. Preparou-se uma prova em branco, nas mesmas condições e titular. CÁLCULO: Manual de Estágio AULA 4 – ROTEIRO 1 : Propriedades funcionais de proteínas OBJETIVO: Comparar o efeito de sais na C.R.A de carnes, observar a formação do coalho no leite e verificar o efeito dos íons cálcio em sua formação e a preparação do glúten o estudo de suas propriedades. Resultados e discussão: Pesou-se 100,0 g de carne moída, sem gordura, em um béquer de 250 ml, também pesado; Incorporou-se a primeira porção 5,0 g de cloreto de sódio, a segunda 5,0 g de fosfato dissódico e a terceira foi utilizada como controle; Misturou-se homogeneizando cada uma das amostras. Em seguida tampou as amostras com papel alumínio e levou ao cozimento em banho maria durante 30 minutos; Deixou-as esfriando e pesou-se. Mediu-se o líquido que se formou durante o cozimento com uma proveta, logo em seguida cortou-se as amostras e comparou-se a cor e a textura. Resultados pesados: SAL FOSFATO DISSODICO SÓ CARNE BEQUER 96,83g 126,54g 97,85g FINAL 201,78g 231,38g 197,884g VOLUME H20 12,5ml 1,5ml 2ml Conclusão: Manual de Estágio Foi possível obter ótimos resultados. Ao medir o líquido formado em cada porção de carne identificou-se a mistura que obteve maior retenção de água que no caso foi com o clóreto de sódio, usando 5,0g. A amostra de carne com sal apresentou um aspecto endurecido, já a amostra somente de carne apresentou um odor desagradável, e um pouco avermelhada, não totalmente cozida. B – Glúten: Objetivo: preparação de gluten e o estudo de suas propriedades Resultados e discussão: Pesou-se 50 g de farinha de trigo em um béquer de 100 ml, Adicionou-se 10 ml de NaCl 5% (colocando aos poucos), sovando bastante até que se formou uma massa homogênea, Colocou-se uma bolinha em um béquer com água por 10 minutos; Lavou-se a massa até remover todo o amido. Conclusão: A técnica do glúten foi feita diferente com a que estava no roteiro, com tanto, que houve uma modificação onde foi substituído um item pelo outro, usado então 10 ml de NaCl 5% para amassar a massa, onde concluiu -se o experimento com sucesso. A massa que tinha somente glúten ficou com aspecto molinho, a massa com fermento está bem duro e a amostra com bissulfito de sódio formou uma crosta mais durinha, porém mais mole do que a amostra com fermento Resultado final das massas com glute, fermento e bissulfito de sódio Manual de Estágio REFERÊNCIAS MORETTO, E. et al. Introdução à ciência de alimentos. Florianópolis: UFSC, 2008 TOLEDO METTLER. “Determinação do teor de umidade “; MT.COM. https://www.mt.com/int/pt/home/applications/Laboratory_weighing/moisture- content-determination.html. Acesso em 23/03/2023 ANVISA, Métodos Físico-Químicos para a Análise de Alimentos. IV Edição. Instituto Adolfo Lutz, Brasília; Agência Nacional de Vigilância Sanitária, Ministério da Saúde, 2005. BOBBIO, F. O.; BOBBIO, P. A. Manual de Laboratório de Química de Alimentos. 1. ed. Livraria Varela, 1995. BOBBIO, F. O.; BOBBIO, P. A. Química do processamento de alimentos. 2. ed. Livraria Varela, 2001. Manual de Estágio CECCHI, H. M. Fundamentos teóricos e práticos em análise de alimentos. 2. ed. Editora UNICAMP, 2003. https://www.toledobrasil.com/blog/qual-a-importancia-da-determinacao-da-umidade-em- um-alimento acessado em 23/03/2023 https://mundoeducacao.uol.com.br/curiosidades/agua-presente-nos-alimentos.htm acessado em 25/03/2023