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FABIANA PERES FERNANDES - 22052363 - LICENCIATURA EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS ATIVIDADE DA CATALASE EM TUBÉRCULOS INTRODUÇÃO Durante a respiração, pode haver formação de peróxido de hidrogênio (H2O2), que é tóxico para as células. Sabe-se que essa substância é um potente inibidor de muitas enzimas, devendo existir, portanto, um mecanismo enzimático nos tecidos que promova sua destruição. Há evidências de que as células geralmente contêm enzimas denominadas catalases, que utilizam H2O2: As catalases (CAT) são enzimas que convertem o H2O2 em H2O e O2 . As plantas possuem várias isoformas de catalase, as quais estão presentes nos peroxissomas e glioxissomas. São as principais enzimas de detoxificação do H2O2 em plantas e podem dismutar diretamente o H2O2 ou oxidar substratos, tais como metanol, etanol, formaldeído e ácido fórmico. 2 H2O2 2 H2O + O2 catalase Outras funções de catalases nas plantas ainda não estão determinadas. OBJETIVO Observar a atividade de catalase em tubérculo de batatinha. MATERIAL - Água oxigenada 20 volumes (pode ser cremoso) – use o que tiver em casa - Placa de petri (2) (pode ser um pratinho descartável) - Tubérculo (batata, cara, ...), cenoura PROCEDIMENTO Coloque uma fatia de tubérculo de batatinha em uma placa de Petri e coloque algumas gotas água oxigenada. A evolução de bolhas de oxigênio indica a presença de catalase. Repita a operação com uma fatia de batatinha que tenha sido anteriormente fervida por 5 minutos. Interprete os resultados. QUESTÕES 1. Dê a reação das catalases, indicando o substrato e os produtos. 2 H2O2 Catalase 2 H2O + O2↑ O substrato da reação é o H2O2 e os produtos são a H2O e o O2, que formam as bolhas. 2. Cobrindo fatias de batatinha com água oxigenada, observa-se maior evolução de bolhas de oxigênio nos tecidos da periferia do que nos tecidos internos. Por que? A maior evolução de bolhas na periferia do tubérculo se justifica pela maior atividade metabólica nessa região, uma vez que, por ser um caule tuberoso, as atividades meristemáticas e respiratórias são mais intensas na periferia (próximo às gemas, córtex e anel vascular) do que nas porções internas (medula), onde predomina o acúmulo de amido nos amiloplastos. 3. Que diferenças existem entre catalases, peroxidases e desidrogenases quanto às reações que catalisam? Essas enzimas estão relacionadas às atividades oxidativas e antioxidativas, e ambas apresentam o peróxido de hidrogênio (H2O2) como substrato. A catalase apresenta o H2O2 como substrato, produzindo H2O e O2; as peroxidases utilizam o H2O2 como agente oxidante de determinados compostos orgânicos; as desidrogenases são enzimas que oxidam diferentes compostos orgânicos, elas utilizam o FAD e NAD+ como coenzimas. 4. Explique a principal diferença entre enzimas “preexistentes” e as sintetizadas “de novo”. As enzimas preexistentes são aquelas que se encontram em níveis constantes na célula, pois executam processos essenciais. Já as enzimas sintetizadas “de novo”, são sintetizadas em situações específicas, ou seja, vão depender de algum estímulo. As enzimas catalases são enzimas “preexistentes”, pois estão em níveis constantes nas células.